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第四节 酶类检测(第3页)

3。ck稳定性差,室温放置4h或4c12h以上可使酶失活。

4。宜用血清或肝素抗凝血浆标本进行测定。

肌酸激酶同工酶(ckisoenzyme)

肌酸激酶同工酶是一种二聚体,由m和b两个亚基组成,形成ck-mm、ck-mb和ck-bb三种同工酶,这些同工酶的亚基在体内外可相互转化。ck-bb主要存在于脑组织中,ck-mm和ck-mb主要存在于各种肌肉组织中,不同肌肉同工酶的比例不同,骨骼肌中98%~99%是ck-mm,1%~2%是ck-mb;心肌内80%左右也是ck-mm,但ck-mb占心肌总ck的l5%~25%。各种ck同工酶根据电泳的不同等电点分出若干亚型,如ck-mb可分为ck-mb1和ck-mb2。

ck同工酶常用的测定方法主要有电泳法、柱层析法及免疫抑制法,不同测定方法及同一种方法不同试剂间测定参考值差别较大,建议各实验室根据自己情况建立参考范围。以下参考值仅供参考:

ck-mb:

ck-mm:0.96~1.0;

ck-bb:o。

ck、ck-mb是世界上应用最广泛的心肌损伤指标。既可用于较早期诊断ami,也可用于估计梗死范围大小或再梗死。ck和ck-mb在ami发生后4~6h即可超过正常上限,24h达峰值,48~72h恢复正常。

同ck测定。

门冬氨酸氨基转移酶同工酶(astisoenzyme)

ast有两种同工酶:asts和astm,分别存在于可溶性的细胞质和线粒体。

deae-葡聚糖a50微柱层析法:astm:1.2~3.4卡门单位。

细胞轻度损伤时asts升高显著,而严重损伤时,则astm大量出现于血清中。正常血清所含ast同工酶主要为asts,但在病理状态下,如细胞坏死,则血清中以astm为主。测定astm可用于判定细胞坏死严重程度,有利于推测患者预后。其临床应用主要有:

1。判断肝实质损害程度。

2。协助慢性肝病的鉴别:慢性肝炎活动期astm高于非活动期,肝硬化失代偿期高于代偿期。

3。协助鉴别恶性胆管梗阻与胆囊炎、胆石症:胆囊炎、胆石症患者astm多为正常,而大多数恶性胆管梗阻患者血清astm增高。

4。判定心肌梗死的严重程度及预后。

同ast测定。

a-羟丁酸脱氢酶(hydroxybutyratedehydrogenase,α-hbd)

连续监测法(37c):60~180ul

1。主要用于心肌坏死和肝功能障碍评价。α-hbd为ldh异构酶,用α-酮丁酸为底物测定的ldh活性,以ld1和ld2与α-酮丁酸的亲和力最强,分别为92%和78%,故可视为ld1和ld2的同工酶。其他ldh同工酶与a-酮丁酸也有一定的亲和力,如ld3为55%、ld4为39%、ld5为25%。

2。ami时,α-hbd与ldh同期升高,α-hbdldh>-0.8或>1,增高1~10倍以上并与ldh演变相一致或稍早。肝病时也可见升高,但α-hbdldh比值

3。α-hbd和ldh同时升高可见于甲状腺功能减退症及其他原因引起的ldh显著增高时。

1。避免溶血,溶血样品可导致测定结果升高。

2。应在2h内分离血清或血浆,室温下放置不超过8h,2~8c不超过48h。急诊时应及时测定。

3。肝素、草酸盐抗凝剂对测定结果有影响。

淀粉酶(amylase,amy)

eps速率法:1。血清0~220ul,尿液o~1oooul

1。血清(尿)amy活性是诊断胰腺疾病的重要指标。急性胰腺炎时,血和尿中的amy显著升高。急性胰腺炎发病后8~12h,血清amy即开始升高,12~24h达高峰,2~5d恢复正常。如超过500u,即有诊断意义,达350u应怀疑此病。尿amy于急性胰腺炎发病后12~24h开始升高,下降也比血清amy慢,所以在急性胰腺炎发病的后期测定尿amy更有价值。

2。急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔以及吗啡注射后等均可使amy升高,但常低于500u。

3。amy降低见于肝病。

1。口服避孕药、磺胺、噻嗪利尿药、甲基胆碱、可待因、吗啡、麻醉药、止痛药等可使测定结果偏高。

2。草酸盐、枸橼酸盐及氟化钠等抗凝剂可抑制amy活性,使测定结果偏低。肝素对amy无抑制作用。

3。唾液含高浓度淀粉酶,须防止带人。

脂肪酶(lipase,lps)

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